ПЦР-диагностика клещевых инфекций

Иксодовые клещи переносят множество инфекций, среди которых на территории РФ наибольшее значение имеют вирус клещевого энцефалита (TBEV), Borrelia burgdorferi sl (возбудитель болезни Лайма, или Лайм-боррелиоза), Anaplasma phagocytophillum (возбудитель гранулоцитарного анаплазмоза) и Erlichia chaffeensis/muris (возбудитель моноцитарного эрлихиоза).

Поскольку от 10 до 15 процентов клещей, положительных в ПЦР на какой-либо из вышеперечисленных возбудителей, содержат одновременно два патогена, актуально исследовать клещей на наличие всех этих возбудителей одновременно.

Реагенты для выявления важнейших клещевых инфекций

Набор АмплиСенс® TBEV, B.burgdorferi sl, A.phagocytophillum, E.chaffeensis/E.muris-FL  позволяет решать две задачи:

• Выявление возбудителей клещевых инфекций в клещах рода Ixodes с целью оценки распространенности различных инфекций в их популяции (или в одном конкретном клеще для прогноза в отношении человека, пострадавшего от его укуса).
• Диагностика и дифференциальная диагностика клещевых инфекций у лиц с характерными клиническими проявлениями (мышечные боли, лихорадка, сыпь и т.п.).

Показано, что при ПЦР-исследовании проб крови, взятых при поступлении больного, возможно установление этиологии заболевания у 39% больных, в то время как на основании серологических данных диагноз, как правило, ставится не ранее второй недели лечения. Метод ПЦР (и данный набор реагентов в частности) не предназначен для исследования крови подвергшихся укусам клещей бессимптомных лиц с целью выявить их инфицированность.

Биоматериалы для проведения исследований: клещи, кровь, ликвор, аутоптаты.

Рекомендации по пробоподготовке клещей: 

Клещи	Рекомендации по пулированию	Объем физ. раствора/PBS для гомогенизации	Объем клещевой суспензии для экстракции РНК
Dermacentor	не пулировать, исследовать индивидуально	500 мкл	50 мкл
Ixodes	исследовать индивидуально или пулировать (до 10 особей в пуле)	1000 мкл для пулов клещей; 300 мкл при индивидуальном тестировании клещей	100 мкл

Наборы реагентов для выявления отдельных клещевых инфекций:

Название	Назначение	Формат детекции	Каталожный номер
«АмплиСенс® Borrelia miyamotoi-FL»	Выявление ДНК Borrelia miyamotoi	FRT	H-2791-1
«АмплиСенс® Rickettsia conorii-FL»	Выявление ДНК Rickettsia conorii	FRT	H-2741-1

Методические указания МУ 3.1.3012-12 Сбор, учет и подготовка к лабораторному исследованию кровососущих членистоногих в природных очагах опасных инфекционных болезней (Скачать)